மைக்கோபிளாஸ்மா காலிசெப்டிகம் ஏபி டெஸ்ட் கிட் (எலிசா)
ELISA செயல்முறை:
1) முன் - பூசப்பட்ட மைக்ரோபிளேட்டை எடுத்துக் கொள்ளுங்கள் (மாதிரி அளவிற்கு ஏற்ப பல நேர பயன்பாட்டை அவிழ்க்க முடியும்), மாதிரி கிணறுகளுக்கு 100μl நீர்த்த சீரம் சேர்க்கவும், இதற்கிடையில் எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டுக்கு 1 கிணறு, நேர்மறை கட்டுப்பாட்டுக்கு தனித்தனியாக 2 கிணறுகள். அதன் கிணறுகளில் 100μl எதிர்மறை/நேர்மறை கட்டுப்பாட்டை சேர்க்கவும். மென்மையாக அசைக்கவும், 30 நிமிடம் 37 at இல் நிரம்பி வழியும், மூடிமறைக்க வேண்டாம்.
2) கிணறுகளில் இருந்து திரவத்தை ஊற்றவும், ஒவ்வொரு கிணற்றிலும் 250 μl நீர்த்த சலவை இடையகத்தைச் சேர்க்கவும், ஊற்றவும். உறிஞ்சக்கூடிய காகிதத்தில் உலர கடைசியாக 4 - 6 முறை மீண்டும் செய்யவும்.
3) ஒவ்வொரு கிணற்றுக்கும் 100μl என்சைம் கான்ஜுகேட் சேர்த்து, மென்மையாக குலுக்கவும், 37 at க்கு 30 நிமிடம் மூடி வைக்கவும்.
4) படி 2 (சலவை) மீண்டும் செய்யவும். கடைசியாக உறிஞ்சக்கூடிய காகிதத்தில் உலர பாட் நினைவில் கொள்ளுங்கள்.
5) ஒவ்வொரு கிணற்றிலும் 100μl அடி மூலக்கூறு சேர்த்து, சரியாக கலக்கவும், 10 நிமிடம் ATDARK AT37 ℃ இருட்டில் எதிர்வினையாற்றவும்.
6) ஒவ்வொரு கிணற்றிலும் 50μl ஸ்டாப் கரைசலைச் சேர்த்து, 10 நிமிடத்திற்குள் முடிவை அளவிடவும்.
தயாரிப்பு விவரம்:
மைக்கோபிளாஸ்மா காலிசெப்டிகம் (எம்.ஜி) ஆன்டிபாடி எலிசா கிட் ஒரு மறைமுக நொதி இம்யூனோஅஸ்ஸே (மறைமுக எலிசா) ஐ அடிப்படையாகக் கொண்டது .ஒரு ஆன்டிஜென் தட்டுகளில் பூசப்பட்டுள்ளது. ஒரு மாதிரி சீரம் வைரஸுக்கு எதிரான குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்டிருக்கும்போது, அவை தட்டுகளில் உள்ள ஆன்டிஜெனுடன் பிணைக்கப்படும். வரம்பற்ற ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் பிற கூறுகளை கழுவவும். பின்னர் ஒரு குறிப்பிட்ட என்சைம் கான்ஜுகேட் சேர்க்கவும். அடைகாத்தல் மற்றும் கழுவுதல் பிறகு, TMB அடி மூலக்கூறைச் சேர்க்கவும். ஒரு வண்ணமயமாக்கல் எதிர்வினை தோன்றும், இது ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டர் (450 என்எம்) மூலம் அளவிடப்படுகிறது.
பயன்பாடு:
கோழி சீரம் நகரில் மைக்கோபிளாஸ்மா காலிசெப்டிகம் (எம்.ஜி) ஆன்டிபாடியைக் கண்டறிந்து, சிக்கன் பண்ணையில் மைக்கோபிளாஸ்மா காலிசெப்டிகம் (எம்.ஜி) தடுப்பூசி மூலம் ஆன்டிபாடி நிலையை மதிப்பிடுவதற்கும், செரோலாஜிக்கல் பாதிக்கப்பட்ட கோழியைக் கண்டறிய உதவுவதற்கும் இந்த கிட் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
சேமிப்பு: இருட்டில் 2 - 8 at இல் சேமிக்கிறது.
நிர்வாக தரநிலைகள்:சர்வதேச தரநிலை.